磺胺类药物残留检测实验提供的仪器及方法

发布时间：2025-01-08　来源：新芝生物　浏览量：0

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　　磺胺类药物是一种具有对氨基苯磺酰胺结构的抗生素，具有广谱抗菌效果，广泛应用于畜牧生产行业。过度使用磺胺类药物饲养会通过动物食可用组织积累在人体内，有严重副作用和致癌性，对人体健康造成损害。我国规定所有使用动物的肌肉、脂肪肝、肾脏食品中磺胺类药物的最大残留量为0.1 mg/kg。因此对于可食用动物组织中的磺胺类药物残留的检测技术极其重要。

　　磺胺类药物检测方法主要有液相色谱法、液相色谱-串联质谱法、酶联免疫发等。其中2014年农质发发布的检测方法中以高效液相色谱法为检测标准，目前许多检测实验室开发了液相色谱-串联质谱法进行样品中磺胺类药物的残留，提高了检测方法分辨率和检测结果的准确性。目前以官方权威的高效液相色谱法为例，对完整实验过程和所需试剂和仪器设备进行介绍，液相色谱-质谱仪联用方法也会在文末补充质谱仪设置参数。

磺胺类药物残留检测方法

1.试剂配置

　　配置95%、80%乙腈溶液(含0.2%甲酸)，配置标准液储备液1mg/mL，梯度稀释配置样品工作液，配置完成后保存。

2.样品前处理

　　取检测样品和对照样品利用高速分散器(高速匀浆机)对样品进行均质分散，利用超声波细胞粉碎机对细胞进行进一步破碎，完全释放出细胞内含物。

　　我们新芝为客户提供两种能够进行组织分散仪器，S10手提式高速匀浆机以及XHF-DY高速分散器分别能够故处理小体积(1-120mL)和大体积(3-1000mL)处理量，供需选择。同时提供超声波细胞粉碎机SCIENTZ-IID进行(0.5-600mL样品量)细胞的破碎处理。

　　下图是具体性能和参数：

仪器及参数

3.标准曲线绘制

　　分别准确量取磺胺类药物标准品工作液，用梯度稀释成浓度为0.05、0.1、0.5、1.0、5.0µg/mL(流动相稀释)系列混合标准溶液并进行测量，绘制标准曲线

4.提取

　　称取试料5(±0.05)g于50 mL离心管中，加入无水硫酸钠4 g，乙腈15 mL，以10000r/min以上的速度均质60 s后，以5000 r/min速度离心5 min，将上层溶液转移到另一离心管中，下层残渣加乙腈15 mL，涡旋混匀1 min，5000 r/min速度离心5 min，合并两次的上清液于同一离心管中，加正己烷10 mL，振荡5 min，静置或离心分层后，取下层液体，加入正丙醇5 mL，50℃氮吹干，加95%乙腈溶液3 mL，涡旋混合1 min，超声萃取2 min，作为备用液。

　　新芝能够为客户提供高速冷冻离心机HSC-2015L和HSC-3020L两款，其中HSC3020L是前一款的升级款。提供DT系列的超声波清洗机，助力超声萃取，提高检测准确度。同时可应用于超滤和液相检测前脱气功能：

高速冷冻离心机

加热超声波清洗机

5.样品净化

　　取95%乙腈溶液3mL活化碱性氧化铝小柱，将上述备用液全部过柱。用95%乙腈溶液5mL涤鸡心瓶后过柱，不收集，挤干或负压抽干柱子里的液体，用80%乙腈溶液10mL洗脱，收集洗脱液，加入正丙醇5 mL后，50℃氮吹干，准确加入流动相溶解2.0mL，涡旋混合1 min，超声2 min，过0.22µm滤膜后，取滤液上机分析。

6.测定

　　高效液相色谱参考条件

　　色谱柱： C18，250mm×4.6mm(i.d.)，粒径5µm，或相当者;

　　流动相：乙腈-甲醇-水-冰乙酸(2+2+9+0.2);

　　流速：1mL/min;

　　检测波长：270nm;

　　进样量：20µL;

　　柱温：30 ℃

　　质谱仪参考条件(AB SCIEX API 4000+质谱联用仪)

　　电喷雾离子源(ESI)：正离子电离模式;

　　去溶剂温度：550 °C;

　　气帘气压力：172 kPa;