外用半固体制剂包括乳膏剂、软膏剂和凝胶剂等。药物活性成分(active pharmaceutical ingredient，API)的释放对于外用半固体制剂的质量影响至关重要，药物释放在很大程度上取决于其配方组成和制备过程。体外释放试验(in vitro release test，IVRT)可用来评估 API 的释放速率，检测由于制剂变化或API理化性质的差异而可能引起的释放速率之间的不同。

甲硝唑是一种抗生素和抗原虫剂，用于治疗或预防厌氧菌引起的系统或局部感染，而甲硝唑凝胶半固体制剂则主要用于炎症性丘疹、脓疱疮、酒渣鼻红斑的局部治疗。

本次实验我们采用了新芝生物TDS-1012全自动透皮扩散取样系统（简称：TDS-1012）设备对甲硝唑凝胶的体外释放进行研究。

实验目的

01   检测720min时间内甲硝唑累计扩散量

02   检测TDS-1012的扩散曲线的一致性

实验方法

 实验步骤

对照品储备溶液制备

精密称取甲硝唑对照品59.61mg至10ml容量瓶中，用50%的甲醇水溶液溶解并稀释至刻度，制成浓度为5.961mg/ml的对照品储备溶液。

配置标准曲线点

将5.961mg/ml甲硝唑对照品储备液用0.9%生理盐水稀释制成浓度分别为29.81μg/ml、59.61μg/ml、119.2μg/ml、238.4μg/ml、298.1μg/ml。

供试品配制

（1）取经生理盐水浸泡30min左右的尼龙膜（25mm），将2mm厚度的定量环至于其上，用滴管吸取甲硝唑凝胶适量（约0.37g），共10组，精密称定后将其至于扩散池上固定。

（2）取样时间为15、30、45、60、75、90、120、180、240、300、360、420、480、540、600、720min，共16个时间点。

   说明：根据药物服用指南：早晚各一次涂抹，故选择研究该药物12小时内释放情况。

 全自动扩散取样系统参数（TDS-1012）

扩散池：定量环内孔径为15mm（膜面积1.76625cm2）；扩散池体积12ml

药品：尼美欣（批号240203）

接受介质：生理盐水

温度：32℃±0.5

转速：400rpm

 色谱条件

仪器：Aglient 1260 Infinity II

色谱柱：Extend- C18( 460x 250nm, 5μm)

检测器：DAD

波长：254nm

流速：1.0 ml/min

进样量：20μL

柱温：30℃

实验结果

 甲硝唑对照品标准曲线

图1  甲硝唑标准曲线图

 甲硝唑凝胶累计扩散量

表2  不同时间点的检测峰面积

说明：根据Y=67.521x-23.047线性方程计算出每个时间点的扩散浓度（x：浓度 μg/mL；y：峰面积），然后再根据Qn =(VCn+∑-1V C¡)/A公式计算累积透过量（mg/cm2）；其中V为接收室中接收液的体积，Vi为i时间段接收室中取出接收液的体积。Cn为第n个取样时间点测得的接收液中药物浓度，A为药物有效扩散面积（1.76625），Ci表示第i个取样时间点测得的接收液中药物浓度。

表3  不同时间段的累计扩散量

 甲硝唑凝胶累计扩散量

图2  单位面积累计渗透量时间曲线

结论

01   从图2和表3数据图可看出，不同扩散池中甲硝唑凝胶的单位面积累计扩散量的相对标准偏差（RSD）均在4.0%以内，且随着时间的推移，RSD稳定在约1.1%。这不仅表明渗透扩散的精密度非常好，也反映了仪器的稳定性。

02   按甲硝唑标示量计（5g:37.5mg），720min的平均扩散量为2.6610mg，累计扩散量为标示量的95.89%，结果反映了TDS-1012仪器在凝胶剂上能够有效地测定药物的扩散特性，从而为药物释放研究提供可靠的数据支持。

全自动透皮扩散取样系统